<track id="bynih"><ruby id="bynih"></ruby></track>
    您好!歡迎來到陜西英菲萊特生物科技有限公司官網

    服務熱線: 176-2928-9696

    ?
    • 陜西英菲萊特生物科技有限公司
    • 咨詢熱線: 17629289696
    • 公司地址:陜西省西咸新區灃西新城西部云谷二期7A棟

    實體瘤免疫治療的TCR工程T細胞

    文章出處:藝妙達 人氣:120 發表時間: 2022-11-23 16:16:25

    T細胞免疫療法仍然是一種有吸引力的癌癥免疫治療方法。T細胞免疫療法主要采用嵌合抗原受體(CAR)和T細胞受體(TCR)工程化的T細胞。CAR-T細胞療法已成為治療血液系統惡性腫瘤的一項重要突破。TCR-T細胞可以識別在細胞表面和細胞內表達的抗原。雖然TCR-T細胞尚未被批準用于臨床,但已經進行了許多臨床試驗,特別是對實體瘤。在這里,總結了目前TCR-T細胞進展及其在實體瘤免疫治療中的潛在優勢。

    前言

    細胞免疫療法在癌癥治療方面顯示出巨大潛力。該方法使用基因工程技術修飾T細胞,使其具有識別和殺傷腫瘤細胞的能力。目前,T細胞免疫治療有兩種:嵌合抗原受體T(CAR-T)細胞和T細胞受體(TCR)工程T細胞。在這些方法中,CAR-T細胞療法在臨床試驗中顯示出令人振奮的結果,并且已有幾種產品被批準用于治療血液系統惡性腫瘤。它在實體瘤中的效果仍然不理想。目前,TCR-T細胞治療已被證明在實體瘤治療方面具有巨大潛力。這里主要總結了利用腫瘤抗原特異性TCR-T細胞進行抗實體瘤免疫治療的研究現狀。

    TCR-T細胞構建

    TCR是T細胞表面的一種分子,它特異性識別和介導免疫反應,由兩個二硫鍵連接的高度可變的異質肽鏈組成。TCR包括4個肽鏈,α、β、γ和δ。α和β肽鏈形成αβ TCR,而γ和δ肽鏈形成γδ TCR。αβ TCR通過與腫瘤細胞或抗原呈遞細胞(APC)上的主要組織相容性復合物(MHC)結合來激活TCR信號通路,然后激活一系列細胞內蛋白,包括CD3ζ、70-kD zeta相關蛋白(ZAP70)和活化T細胞2(NFAT2)的核因子,從而介導T細胞免疫功能。TCR-T細胞是通過基因工程將特異性識別腫瘤抗原的TCR基因序列轉移到T細胞中來構建的,從而使T細胞具有特異性殺傷腫瘤細胞的能力。TCR-T細胞不僅可以識別腫瘤細胞表面的特異性抗原,還可以識別細胞內抗原,這使得TCR-T細胞能夠識別更廣譜的靶抗原。

    為了構建TCR修飾的T細胞,第一步是分離并獲得特異性識別腫瘤特異性抗原(TSA)或腫瘤相關抗原(TAA)表位的TCR。TCR可以從患者腫瘤組織中的腫瘤浸潤T細胞或MHC I/II限制性TSA或TAA肽誘導的健康供體T細胞中分離出來。一旦獲得具有最高親和力的T細胞克隆,就可借助分子克隆將TCR α β鏈克隆到靶T細胞中,以獲得特異性識別腫瘤抗原的能力(圖1)。獲得腫瘤抗原特異性TCR的方法也在不斷改進。研究人員發現,特定的TCR Vβ克隆可以通過聚合酶鏈反應(PCR)和基因掃描識別白血病患者的白血病相關抗原。還發現,與慢性髓系白血?。–ML)相關的TCR Vβ克隆通過用MHC限制性抗原肽和TCR Vβ基因序列刺激健康供體中的T細胞來特異性識別Wilm的腫瘤1(WT1)抗原肽。最近,還發現了與肺癌患者預后密切相關的TCR Vβ克隆。最近通過單細胞測序分析了B細胞急性淋巴白血?。˙-ALL)患者T細胞的TCR Vα和Vβ鏈基因,發現患者的T細胞具有多克隆亞型,其中大多數是效應子亞型。這些結果表明,通過單細胞測序可以獲得特異性配對的腫瘤抗原TCR Vα和Vβ鏈序列,可為后續構建特異性高親和力TCR-T細胞提供更準確的信息。2019年Kisielow等人提出了一種篩選特異性T細胞表位的新技術【見參考文獻】。通過構建pMHC-TCR(MCR)工程報告細胞,能夠篩選特異性識別病毒和腫瘤抗原的MHC II T細胞表位。還證明,通過該平臺篩選的腫瘤新抗原相關淋巴細胞可以保護小鼠免受腫瘤細胞的侵害。這些發現表明,這些技術的組合應用可能能夠識別和幫助構建個體患者的腫瘤抗原特異性的高親和力TCR-T細胞。

    ●圖1 臨床應用TCR-T細胞構建制備示意圖。

    01 TCR-T細胞開發過程

    自20世紀90年代以來,許多研究報道在黑色素瘤患者的腫瘤浸潤淋巴細胞(TILs)和外周血中發現了特異性TCR Vα/Vβ T細胞克隆。這些克隆T細胞具有特異性抗黑色素瘤細胞毒性,在體外擴增的特異性單鏈TCR Vβ T細胞具有特異性殺傷作用。已經證明逆轉錄病毒產生的TCRαβ基因轉導系統可以重建小鼠外周T細胞的抗原特異性免疫。還證實,通過基因工程構建的特異性TCR α/β T細胞可以在體外有效殺傷CML細胞。這些結果表明,單鏈和雙鏈TCR-T細胞都可以有效地識別和殺傷靶細胞。

    小鼠仍然是研究腫瘤特異性TCR-T細胞療法的主要模式生物,使用的主要T細胞模型是αβ CTL。在臨床環境中,在設計癌癥患者免疫療法時,動態分析克隆增殖性TCR Vβ亞族T細胞的持久性與疾病狀態之間的關系,可以提供關于特定細胞免疫功能的更詳細信息。一項研究表明,在大細胞肺癌患者中存在持續的TCR Vα5 /Vβ7 CTL克隆,該克隆在手術后3年仍可檢測到。這些數據表明,該T細胞克隆的持久性可能與該患者持續緩解的維持有關。黑色素瘤臨床試驗也表明,靶向Melan-A特異性CD8 CTL細胞可以有效緩解患者病情。由于γδ T細胞不依賴于MHC,它們在腫瘤特異性免疫治療中也起著重要作用。供體外周血誘導的γδ T細胞可有效殺傷腫瘤細胞,例如Vγ9Vδ2 T細胞可溶解肝癌和直腸癌細胞,但對正常組織無細胞毒性作用。此外,一些研究表明,一類表面表達自然殺傷分子1.1(NK1.1)的T細胞可能在缺乏HLA-I分子表達的腫瘤細胞中起細胞毒性作用。例如,粘蛋白1(MUC1)抗原在前列腺癌細胞中表達,但幾乎所有轉移性癌細胞都缺乏HLA-I分子;因此,轉移性癌細胞不能被T細胞特異性識別。然而,該抗原可能通過刺激NK細胞在抗腫瘤細胞中起有效作用。因此γδ T細胞和NK T細胞也被用于構建TCR-T和TCR-NK細胞。

    02 臨床前研究

    TCR-T細胞的體外和動物實驗開始非常早,研究人員于1986年在小鼠T細胞中成功轉導MHC限制性TCRα和TCRβ基因。1999年成功地將黑色素瘤特異性TCR Vα和Vβ鏈轉移到人外周血原代T細胞中,并證實該方法構建的TCR-T細胞可以在體外有效殺傷腫瘤細胞。隨著鑒定方法和實驗技術的不斷進步,對體外和動物腫瘤模型中TCR-T細胞的研究越來越多。使用逆轉錄病毒載體在外周血T細胞中構建了編碼B16黑色素瘤抗原gp100的前黑素小體蛋白1(PMEL-1)TCR,并且以這種方式構建的TCR可以有效地減緩B16荷瘤小鼠腫瘤細胞的發展。研究證明,靶向酪氨酸酶(一種參與黑色素合成的酶)的TCR-T細胞也可以有效地殺傷體內B16/A2K(b)小鼠黑色素瘤細胞。這一結果進一步證實了TCR-T細胞識別的抗原不僅位于細胞表面,而且位于細胞內。研究人員通過γ逆轉錄病毒(MSGV1)在小鼠CD8 T細胞中構建MHC-I限制性黑素細胞分化抗原100(PEML-1)TCR,并在小鼠CD4 T細胞中構建MHC-II限制性酪氨酸酶相關蛋白1(TRP-1)TCR。研究證實,MSGV1-PEML-1 TCR-CD8 T細胞和MSGV1-TRP-1 TCR-CD4 T細胞均可有效殺傷B16黑色素瘤小鼠的腫瘤細胞。該結果進一步闡明了CD8和CD4 T細胞在抗腫瘤過程中的功能和相互作用。在小鼠模型中將卵清蛋白(OVA)特異性OT-1 TCRαβ基因轉導為γδ T細胞,證實以這種方式構建的TCR-T細胞可以有效地殺傷腫瘤細胞并避免衍生的TCRαβ鏈之間的內部二聚化。這些數據表明,使用不同類型的T細胞構建TCR-T細胞可以維持抗腫瘤作用并避免不良反應。這些結果也拓寬了構建TCR-T細胞的細胞選擇范圍。最近,有研究人員構建了HLA-A*02:01限制性新抗原文庫,將其轉移到HLA匹配的APC中,以刺激患者外周血中的T細胞。然后,該小組篩選并構建了靶向KIAA1429D1258E突變的新抗原特異性TCR,這些TCR-T細胞在小鼠體內顯示出殺傷人頭頸部鱗狀細胞癌的效率。該結果為在難以獲得腫瘤組織的條件下篩選突變新抗原特異性TCRs提供了新的策略。此外,這一發現表明,針對突變抗原的TCR-T細胞的構建和對攜帶突變抗原的精確個體化免疫療法的特異性殺傷可能是臨床試驗的一種策略。


    +86-17629289696
    男女在床做爰视频了免费,国产成久久免费精品AV片,欧洲VODAFONEWIFI14
    <track id="bynih"><ruby id="bynih"></ruby></track>